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首頁>產(chǎn)品中心>>>AS6329113乳酸脫氫酶活性(WST-8法) 微量法

乳酸脫氫酶活性(WST-8法) 微量法

簡要描述:

?乳酸脫氫酶(LDH)活性微量法測定的原理?是通過檢測LDH催化丙酮酸還原為乳酸的過程中NADH的生成量來間接測定LDH的活性。

更新時間:2025-04-11

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乳酸脫氫酶活性(WST-8法) 微量法

?乳酸脫氫酶(LDH)活性微量法測定的原理?是通過檢測LDH催化丙酮酸還原為乳酸的過程中NADH的生成量來間接測定LDH的活性。

具體過程如下:

?反應原理?:LDH的作用下,NAD+被還原生成NADH。NADHWST-8相互作用產(chǎn)生顏色,從而進行比色測定(λmax=450 nm)?。

?反應條件?:LDHNAD還原為NADH,NADHWST-8相互作用產(chǎn)生顏色。這個反應在冰上避光進行,各組分(如Assay BufferLactate、NAD、WST-8、Enhancer)需在實驗前從冰箱中取出并平衡至室溫,整個過程需避光操作?。

?吸光度測量?:450 nm波長下測量吸光度,吸光度與LDH活性成正比,可以通過比色法測定LDH的活性?。

?實驗步驟和所需設備?:

?實驗步驟?:準備工作液(1×Assay Buffer、NADWST-8、EnhancerLactate混合均勻),將工作液加入96孔板或微量玻璃比色皿中,加入待測樣品,37℃恒溫孵育一定時間后測量吸光度?。

?所需設備?:酶標儀或可見分光光度計(能測450 nm處的吸光度)、恒溫箱、制冰機、低溫離心機、96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭、去離子水、勻漿器(如果是組織樣本)?。

實驗注意事項?:

?試劑保存?:各組分(如Assay BufferLactateNAD、WST-8Enhancer)需在冰上避光保存,避免反復凍融?。

?操作注意事項?:整個實驗過程需在冰上避光進行,避免光照影響結(jié)果?。


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