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關(guān)于大鼠ELISA試劑盒的標(biāo)本處理 你需要知道的幾點(diǎn)
點(diǎn)擊次數(shù):771 更新時(shí)間:2019-01-10
  大鼠ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體水平。用純化的病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體,再與HRP標(biāo)記的病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)抗體濃度。
  關(guān)于大鼠ELISA試劑盒的標(biāo)本處理,您需要知道下列這幾點(diǎn):
  1、本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé),不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。
  2、實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
  3、若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等,所以可能存在檢測(cè)不出的情況。
  4、建議使用新鮮樣本,保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。
  5、若所檢樣本不包含在說(shuō)明書(shū)所列樣本之中,建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性,并注意留存樣本。
  6、使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。
  7、某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測(cè)出。
  大鼠elisa試劑盒所具有的高特異性優(yōu)勢(shì)有哪些呢?
  1. 特異性:指大鼠elisa試劑盒正確檢定不存在的被檢物質(zhì)的才干(無(wú)假陽(yáng)性),取決于包被抗原(體)及符號(hào)抗原(體)的純度及特異性。
  2. 安穩(wěn)性:大鼠elisa試劑盒在規(guī)則條件下能儲(chǔ)存的時(shí)間,一般選用破壞性實(shí)驗(yàn)行將試劑存放于37℃保存,定時(shí)測(cè)定其靈敏度,特異性和精密度等方針,直到其質(zhì)量方針開(kāi)端下降中止,一般認(rèn)為37℃每安穩(wěn)一天相當(dāng)于4-10℃保存一個(gè)半月。
  3. 簡(jiǎn)便性:大鼠elisa試劑盒指在不影響試劑的前三項(xiàng)方針的前題下,實(shí)驗(yàn)和測(cè)定過(guò)程越少越好,在定性實(shí)驗(yàn)中成果判別簡(jiǎn)略明晰,定量實(shí)驗(yàn)成果核算也應(yīng)簡(jiǎn)略。 受方法學(xué)及技術(shù)條件的約束,在酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定中有時(shí)不可避免的會(huì)出現(xiàn)必定的非特異性,咱們可以通過(guò)以上辦法把非特異性顯色降至至低限底,然后前進(jìn)檢測(cè)的特異性,并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)成果。
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