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蛋白檢測(cè)試劑盒常用的檢查方法你了解嗎?
點(diǎn)擊次數(shù):801 更新時(shí)間:2019-01-02
  蛋白檢測(cè)試劑盒常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗滌后每孔內(nèi)加入適當(dāng)稀釋度的酶標(biāo)抗人IgG抗體,CDH16試劑盒,人KSP鈣黏蛋白檢測(cè)試劑盒保溫后洗滌, 加底物顯色,終止酶反應(yīng)后,分別測(cè)每孔溶液的吸光度??刂品磻?yīng)條件,使各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右。蛋白檢測(cè)試劑盒計(jì)算全部讀數(shù)的平均值。所有單個(gè)讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差,應(yīng)小于10%。
  蛋白檢測(cè)試劑盒使用方法:
  1. 試劑準(zhǔn)備:將所有試劑(G250 染色液、BSA 溶液、樣品)平衡至室溫。
  2. 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:取 50 μl BSA 溶液(2 mg/ml),用溶解蛋白樣品的緩沖液稀釋至 200 μl,終濃度為 0.5 mg/ml。為了簡(jiǎn)便起見(jiàn),也可以用生理鹽水或 PBS 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
  3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)設(shè)置參考如下。標(biāo)準(zhǔn)品的用量分別為0、1、2、4、8、12、16和20 μl,加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足到20 μl。推薦設(shè)兩個(gè)重復(fù)。
  4. 樣品孔中加入20 μl待測(cè)樣品。如樣品濃度過(guò)高,可適當(dāng)稀釋?zhuān)怪湓跇?biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)范圍內(nèi)。
  5. 每孔加入200 μl G250染色液,室溫放置2 - 5分鐘。
  6. 用酶標(biāo)儀測(cè)定OD595,或560 - 610 nm之間的其它波長(zhǎng)的吸光度。
  7. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算出樣品中的蛋白濃度。
  蛋白檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):
  1、試劑與標(biāo)本量可按生化分析儀器要求恒比例增減。
  2、試驗(yàn)值若超過(guò)線(xiàn)性范圍,應(yīng)該對(duì)樣本進(jìn)行稀釋?zhuān)ㄗh根據(jù)使用的具體儀器稀釋樣本。
  3、試劑中含有0.05% Proclin-300作保存劑。不要吞入,避免接觸皮膚和粘膜。若不慎導(dǎo)致接觸皮膚或粘膜,應(yīng)立即用
  蛋白檢測(cè)試劑盒多用于人或動(dòng)物血清、血漿、組織等樣本中的總蛋白含量測(cè)定??赏ㄟ^(guò)比色法分析濃度,在紫外可見(jiàn)光譜中的波長(zhǎng)為540nm。雙縮脲法測(cè)定蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,但易受銅離子螯合劑影響。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
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