国产成人无码av片在线观看不卡,久久久久无码国产精品不卡,熟女少妇人妻中文字幕,精品丰满人妻无套内射

產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 技術(shù)與支持 > 原代細(xì)胞培養(yǎng)實驗步驟
原代細(xì)胞培養(yǎng)實驗步驟
點擊次數(shù):1689 更新時間:2022-04-24

原代細(xì)胞培養(yǎng)實驗步驟:

1、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。

2、在超凈工作臺中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,去除小腦和間腦。

3、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。

4、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質(zhì)。

5、大腦皮質(zhì)放于DMEM中(含慶大霉素和谷氨酰胺 ),剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

6、室溫1 000×g離心8min,去上清液。

7、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。

8、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。

9、沉淀加入2ml DMEM(含慶大霉素和谷氨酰胺)培養(yǎng)液懸浮混勻,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。

10、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM
漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。

加入DMEM*培養(yǎng)液(20%FBS,4ug/ml嘌呤霉素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含嘌呤霉素的混合培養(yǎng)基,隨后隔天換液。


国产成人精品热玖玖玖| 国产亚洲精品久久久一区| 农村欧美丰满熟妇XXXX| 性生交大片免费看淑女出招| 岳叫我弄进去a片免费视频| 又硬又水多又坚少妇18P| 男女边吃奶边做边爱视频| 国产无遮挡吃奶视频网站 | 国产在线拍揄自揄拍免费下载| 亚洲AV无码成人黄网站在线观看| 欧美国产激情二区三区蜜月| 国内精品一区二区三区亚洲熟女乱综合一区二区 | 国产av一区二区三区日韩| 欧美老妇xxxxx性开放| 欧美精产国品一二三产品| 美女扒开腿让男人桶爽久久软件| 久久久久人妻精品一区三寸| 国产成人精品999在线观看| 上司人妻互换中文字幕| 国产aⅤ无码专区亚洲av| 久久精品亚洲av中文2区金莲| 中文字幕亚洲乱码熟女在线萌芽| 朝鲜少妇xxxx做受| 国产精品无码亚洲精品2021| 国产精品久久久久精品A级| 久久天天躁狠狠躁夜夜av| 三级国产三级在线| 中文字幕人妻无码一区二区三区| 午夜a片免费| 亚洲欧洲∨国产一区二区三区| 亚洲国产欧美国产第一区| 无码爽大片日本无码aaa特黄| 亚洲 欧美 中文 日韩aⅴ| 国产成人精品综合久久久久| 欧美vivoy13高清| 亚洲AV自慰白浆喷水网站少妇| 特级做a爰片毛片免费看| 老熟女与小伙偷欢视频| 国产午夜无码福利在线看网站| 亚洲AV无码专区色爱天堂| www夜插内射视频网站|